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教你如何使用和維護(hù)默克色譜柱

更新時間:2023-06-28 瀏覽次數(shù):947

  默克色譜柱沒有特殊說明,它是評估報告中顯示的流動相,使用前,請務(wù)必注意液相色譜柱的存儲溶液是否與要分析的樣品的流動相混溶。在反相色譜中,如果使用高濃度鹽或緩沖液作為洗脫液,則應(yīng)使用約10%的低濃度有機(jī)相洗脫液進(jìn)行過渡,否則緩沖液中的鹽將處于高濃度有機(jī)相。容易沉淀和阻塞色譜柱。

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  在默克色譜柱運(yùn)行期間,需要注意以下事項以維護(hù)色譜柱。


 ?。?)裝卸,更換色譜柱時,其運(yùn)動應(yīng)輕巧,并且接頭應(yīng)適當(dāng)擰緊。必須避免強(qiáng)烈的機(jī)械振動,以免在柱床中產(chǎn)生空隙。


 ?。?)如果將儀器用于常規(guī)分析并且樣品類型有限,但分析數(shù)量很多,則可能希望為每種常規(guī)分析配置一個列,這將有助于延長使用壽命列的。


  (3)避免壓力和溫度的突然變化以及任何機(jī)械振動。


  溫度突然變化或色譜柱從高處掉落會影響色譜柱的填充條件;色譜柱壓力的突然升高或降低也會沖擊色譜柱中的填料,因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)緩慢進(jìn)行。在進(jìn)樣過程中,請勿將閥門旋轉(zhuǎn)太慢。


  (4)溶劑的組成應(yīng)逐漸改變,尤其是在反相色譜法中,不應(yīng)將其從有機(jī)溶劑直接改變?yōu)樗兴?,反之亦然?/span>


 ?。?)當(dāng)使用色譜柱溫度控制裝置時,應(yīng)注意的是,只有在流動相通過后才能升高溫度。


  (6)一般來說,默克色譜柱不能反吹。僅當(dāng)制造商指示可以反吹色譜柱時,反吹才能清除殘留在色譜柱頭上的雜質(zhì)。否則,反沖會迅速降低色譜柱效率。


 ?。?)選擇適當(dāng)?shù)牧鲃酉啵苊鈸p壞固定相。有時可以在采樣器的前面連接一個預(yù)柱。當(dāng)分析柱是鍵合硅膠時,預(yù)柱是硅膠,因此在進(jìn)入分析柱之前,流動相可以用硅膠“飽和",以防止分析柱中的二氧化硅基質(zhì)溶解。


 ?。?)避免將具有復(fù)雜基質(zhì)的樣品(尤其是生物樣品)直接注入色譜柱中。必須對樣品進(jìn)行預(yù)處理或在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接保護(hù)柱。保護(hù)柱通常是填充有相似固定相的短柱,保護(hù)柱可以并且應(yīng)該經(jīng)常更換。


  (9)經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,以除去殘留在色譜柱中的雜質(zhì)。清潔時,應(yīng)使用可混溶的溶劑替換流路系統(tǒng)中的流動相。逐漸地,每個流動相的體積應(yīng)約為色譜柱體積的20倍,也就是說,常規(guī)分析需要50-75mL。


 ?。?0)存放色譜柱時,用乙腈或甲醇填充色譜柱,并擰緊色譜柱接頭,以防止溶劑蒸發(fā)和干燥。不要將緩沖溶液在柱子中放置過夜或更長時間。


 ?。?1)在使用過程中,如果壓力升高,則可能是燒結(jié)過濾器堵塞。此時,應(yīng)更換過濾器或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清潔。二是大分子進(jìn)入色譜柱,導(dǎo)致色譜柱頭被污染。如果降低柱效或色譜峰變形,則柱頭可能塌陷,死體積增加。


 ?。?2)完成分離和分析后,不應(yīng)立即關(guān)閉色譜分析系統(tǒng),并應(yīng)及時沖洗色譜分析系統(tǒng),通常要超過0.5h,以除去色譜柱中的雜質(zhì)。


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